Tekkiv autoloogne rakuteraapia, milles kasutatakse trombotsüütide rikast plasmat (PRP), võib mängida abistavat rolli erinevates regeneratiivse meditsiini raviplaanides.Ülemaailmne nõudlus kudede parandamise strateegiate järele on luu- ja lihaskonna (MSK) ja seljaaju haiguste, osteoartriidi (OA) ning krooniliste komplekssete ja tulekindlate haavade raviks.PRP-teraapia põhineb asjaolul, et trombotsüütide kasvufaktor (PGF) toetab haavade paranemist ja paranemiskaskaadi (põletikku, proliferatsiooni ja remodelleerumist).Inimestel, in vitro ja loomkatsetes on hinnatud mitmeid erinevaid PRP preparaate.In vitro ja loomkatsete soovitused viivad aga tavaliselt erinevate kliiniliste tulemusteni, kuna mittekliiniliste uuringute tulemusi ja meetodite soovitusi on raske inimeste kliinilisse ravisse üle kanda.Viimastel aastatel on tehtud edusamme PRP-tehnoloogia ja bioloogiliste mõjurite kontseptsiooni mõistmisel ning välja on pakutud uued uurimisjuhised ja uued näidustused.Selles ülevaates käsitleme PRP valmistamise ja koostise uusimaid edusamme, sealhulgas trombotsüütide annust, leukotsüütide aktiivsust ja kaasasündinud ja adaptiivset immuunregulatsiooni, 5-hüdroksütrüptamiini (5-HT) toimet ja valu leevendamist.Lisaks arutasime PRP mehhanismi, mis on seotud põletiku ja angiogeneesiga kudede parandamise ja regenereerimise ajal.Lõpuks vaatame üle mõnede ravimite mõju PRP aktiivsusele.
Autoloogne trombotsüütide rikas plasma (PRP) on pärast ravi autoloogse perifeerse vere vedel osa ja trombotsüütide kontsentratsioon on algtasemest kõrgem.PRP-teraapiat on erinevate näidustuste puhul kasutatud enam kui 30 aastat, mistõttu on suur huvi autogeense PRP potentsiaali vastu regeneratiivses meditsiinis.Termin ortopeediline bioloogiline aine on hiljuti kasutusele võetud lihas-skeleti (MSK) haiguste raviks ja on saavutanud paljulubavaid tulemusi heterogeensete bioaktiivsete PRP-rakkude segude regenereerimisvõimes.Praegu on PRP-ravi sobiv ravivõimalus, millel on kliiniline kasu, ja patsientide teatatud tulemused on julgustavad.Patsientide tulemuste ebajärjekindlus ja uued arusaamad on aga seadnud väljakutse PRP kliinilise rakendamise praktilisusele.Üheks põhjuseks võib olla PRP ja PRP-tüüpi süsteemide hulk ja varieeruvus turul.Need seadmed erinevad PRP kogumismahu ja ettevalmistusskeemi poolest, mille tulemuseks on ainulaadsed PRP omadused ja bioloogilised ained.Lisaks põhjustas konsensuse puudumine PRP ettevalmistamise skeemi standardimise ja kliinilises rakenduses bioloogiliste mõjurite täieliku aruande osas ebajärjekindlate aruannete tulemusteni.PRP või verest pärinevate toodete iseloomustamiseks ja klassifitseerimiseks regeneratiivse meditsiini rakendustes on tehtud palju katseid.Lisaks on ortopeedilisteks ja in vitro tüvirakkude uurimiseks pakutud välja trombotsüütide derivaadid, näiteks inimese trombotsüütide lüsaadid.
Üks esimesi kommentaare PRP kohta avaldati 2006. aastal. Selle ülevaate põhirõhk on trombotsüütide funktsioonil ja toimeviisil, PRP mõjul paranemiskaskaadi igal etapil ning trombotsüütidest pärineva kasvufaktori põhirollil. erinevate PRP näidustuste korral.PRP-uuringute varases staadiumis oli peamine huvi PRP või PRP-geeli vastu mitmete trombotsüütide kasvufaktorite (PGF) olemasolu ja spetsiifilised funktsioonid.
Käesolevas artiklis käsitleme põhjalikult erinevate PRP osakeste struktuuride ja trombotsüütide rakumembraani retseptorite uusimat arengut ning nende mõju kaasasündinud ja adaptiivsele immuunsüsteemi immuunregulatsioonile.Lisaks käsitletakse üksikasjalikult üksikute rakkude rolli, mis võivad PRP-ravi viaalis eksisteerida, ja nende mõju kudede regenereerimisprotsessile.Lisaks kirjeldatakse uusimaid edusamme PRP bioloogiliste ainete, trombotsüütide annuse, spetsiifiliste valgete vereliblede spetsiifiliste mõjude ning PGF-i kontsentratsiooni ja tsütokiinide mõju mõistmisel mesenhümaalsete tüvirakkude (MSC) toitumismõjudele, sealhulgas erinevatele PRP-dele. raku- ja koekeskkond pärast rakusignaali ülekandmist ja parakriinsed mõjud.Samamoodi arutame PRP mehhanismi, mis on seotud põletiku ja angiogeneesiga kudede parandamise ja regenereerimise ajal.Lõpuks vaatame üle PRP valuvaigistava toime, mõnede ravimite mõju PRP aktiivsusele ning PRP ja rehabilitatsiooniprogrammide kombinatsiooni.
Kliinilise trombotsüütiderikka plasmateraapia põhiprintsiibid
PRP preparaadid on üha populaarsemad ja laialdaselt kasutusel erinevates meditsiinivaldkondades.PRP-ravi teaduslik põhiprintsiip on, et kontsentreeritud trombotsüütide süstimine vigastatud kohta võib käivitada kudede paranemise, uue sidekoe sünteesi ja vereringe taastamise, vabastades paljusid bioloogiliselt aktiivseid tegureid (kasvufaktorid, tsütokiinid, lüsosoomid) ja adhesioonivalgud, mis vastutavad hemostaatilise kaskaadi reaktsiooni algatamise eest.Lisaks on vereliistakute vaestes plasmakomponentides (PPP) plasmavalke (nt fibrinogeen, protrombiin ja fibronektiin).PRP kontsentraat võib stimuleerida kasvufaktorite hüperfüsioloogilist vabanemist, et alustada kroonilise vigastuse paranemist ja kiirendada ägeda vigastuse paranemisprotsessi.Kudede parandamise protsessi kõikides etappides soodustavad mitmesugused kasvufaktorid, tsütokiinid ja lokaalsed toimeregulaatorid enamikku raku põhifunktsioone endokriinsete, parakriinsete, autokriinsete ja endokriinsete mehhanismide kaudu.PRP peamisteks eelisteks on selle ohutus ja praeguste kaubanduslike seadmete geniaalne ettevalmistustehnoloogia, mille abil saab valmistada laialdaselt kasutatavaid bioloogilisi aineid.Kõige tähtsam on see, et võrreldes tavaliste kortikosteroididega on PRP autogeenne toode, millel puuduvad teadaolevad kõrvaltoimed.Süstitava PRP koostise valemi ja koostise kohta puudub aga selge regulatsioon ning PRP koostises on suured muutused trombotsüütides, valgete vereliblede (WBC) sisalduses, punaste vereliblede (RBC) saastumises ja PGF kontsentratsioonis.
PRP terminoloogia ja klassifikatsioon
Aastakümneid on kudede paranemise ja regenereerimise stimuleerimiseks kasutatavate PRP-toodete väljatöötamine olnud biomaterjalide ja ravimiteaduse oluline uurimisvaldkond.Kudede paranemise kaskaad hõlmab paljusid osalejaid, sealhulgas trombotsüüte ja nende kasvufaktoreid ning tsütokiini graanuleid, valgeid vereliblesid, fibriini maatriksit ja paljusid teisi sünergistlikke tsütokiine.Selles kaskaadprotsessis toimub keeruline hüübimisprotsess, sealhulgas trombotsüütide aktiveerimine ja sellele järgnev tihenemine ning α- trombotsüütide osakeste sisu vabanemine, fibrinogeeni (eraldub trombotsüütide kaudu või plasmas vaba) agregatsioon fibriinivõrku ja moodustumine. trombotsüütide emboolia korral.
"Universaalne" PRP simuleerib paranemise algust
Algul nimetati terminit "trombotsüütide rikas plasma (PRP)" vereülekande meditsiinis kasutatavaks trombotsüütide kontsentraadiks ja seda kasutatakse ka tänapäeval.Esialgu kasutati neid PRP-tooteid ainult fibriini kudede liimina, samas kui trombotsüüte kasutati ainult tugevama fibriini polümerisatsiooni toetamiseks, et parandada kudede tihendamist, mitte tervendavat stimulant.Pärast seda loodi PRP-tehnoloogia, et simuleerida paranemiskaskaadi algust.Seejärel võeti PRP-tehnoloogia kokku tänu selle võimele juurutada ja vabastada kasvufaktoreid kohalikku mikrokeskkonda.See entusiasm PGF-i kohaletoimetamise vastu peidab sageli teiste komponentide olulist rolli nendes vere derivaatides.Seda entusiasmi süvendab veelgi teaduslike andmete puudumine, müstilised tõekspidamised, ärihuvid ning standardimise ja klassifitseerimise puudumine.
PRP kontsentraadi bioloogia on sama keeruline kui veri ise ja võib olla keerulisem kui traditsioonilised ravimid.PRP tooted on elusad biomaterjalid.Kliinilise PRP rakendamise tulemused sõltuvad patsiendi vere olemuslikest, universaalsetest ja adaptiivsetest omadustest, sealhulgas mitmesugustest muudest rakukomponentidest, mis võivad esineda PRP proovis, ja retseptori lokaalsest mikrokeskkonnast, mis võib olla ägedas või kroonilises seisundis.
Segase PRP terminoloogia ja pakutud klassifikatsioonisüsteemi kokkuvõte
Praktikuid, teadlasi ja ettevõtteid on aastaid vaevanud PRP-toodete ja nende erinevate terminite esialgne arusaamatus ja defektid.Mõned autorid määratlesid PRP ainult trombotsüütidena, teised aga tõid välja, et PRP sisaldab ka punaseid vereliblesid, erinevaid valgeid vereliblesid, fibriini ja suurenenud kontsentratsiooniga bioaktiivseid valke.Seetõttu on kliinilises praktikas kasutusele võetud palju erinevaid PRP bioloogilisi aineid.On pettumus, et kirjanduses puudub tavaliselt bioloogiliste mõjurite üksikasjalik kirjeldus.Toote ettevalmistamise standardimise ja sellele järgnenud klassifikatsioonisüsteemi arendamise ebaõnnestumine tõi kaasa suure hulga erinevate terminite ja lühenditega kirjeldatud PRP-tooteid.Pole üllatav, et muutused PRP preparaatides põhjustavad patsientide ebajärjekindlaid tulemusi.
Kingsley kasutas terminit "trombotsüütide rikas plasma" esmakordselt 1954. aastal. Palju aastaid hiljem avaldasid Ehrenfest et al.Esitati esimene klassifikatsioonisüsteem, mis põhineb kolmel peamisel muutujal (trombotsüütide, leukotsüütide ja fibriini sisaldus) ning paljud PRP tooted jaotati nelja kategooriasse: P-PRP, LR-PRP, puhas trombotsüütiderikas fibriin (P-PRF) ja leukotsüüdid. rikkalik PRF (L-PRF).Need tooted on valmistatud täisautomaatse suletud süsteemi või käsitsi protokolli alusel.Samal ajal on Everts jt.Rõhutati valgete vereliblede mainimise tähtsust PRP preparaatides.Samuti soovitavad nad kasutada PRP preparaatide ja trombotsüütide geeli mitteaktiivsete või aktiveeritud versioonide tähistamiseks sobivat terminoloogiat.
Delong et al.pakkus välja PRP klassifikatsioonisüsteemi, mida nimetatakse trombotsüütideks, aktiveeritud valgelibledeks (PAW), mis põhineb trombotsüütide absoluutarvul, sealhulgas neli trombotsüütide kontsentratsioonivahemikku.Muud parameetrid hõlmavad trombotsüütide aktivaatorite kasutamist ja valgete vereliblede (st neutrofiilide) olemasolu või puudumist.Mishra jt.Pakutakse välja sarnane klassifitseerimissüsteem.Mõni aasta hiljem kirjeldasid Mautner ja tema kolleegid keerukamat ja üksikasjalikumat klassifikatsioonisüsteemi (PLRA).Autor tõestas, et oluline on kirjeldada trombotsüütide absoluutarvu, valgete vereliblede sisaldust (positiivsed või negatiivsed), neutrofiilide protsenti, RBC-d (positiivsed või negatiivsed) ja seda, kas kasutatakse eksogeenset aktiveerimist.2016. aastal tegid Magalon jt.Avaldati DEPA klassifikatsioon, mis põhineb trombotsüütide süstimise annusel, tootmise efektiivsusel, saadud PRP puhtusel ja aktiveerimisprotsessil.Seejärel tutvustasid Lana ja tema kolleegid MARSPILL klassifikatsioonisüsteemi, keskendudes perifeerse vere mononukleaarsetele rakkudele.Hiljuti toetas teaduslik standardimiskomitee Rahvusvahelise Tromboosi ja Hemostaasi Ühingu klassifikatsioonisüsteemi kasutamist, mis põhineb mitmel konsensussoovitusel trombotsüütide toodete, sealhulgas külmutatud ja sulatatud trombotsüütide toodete kasutamise standardimiseks regeneratiivses meditsiinis.
Erinevate praktikute ja teadlaste pakutud PRP klassifikatsioonisüsteemi põhjal võivad paljud ebaõnnestunud katsed standardida arstide poolt kasutatava PRP tootmist, määratlust ja valemit teha õiglase järelduse, mida tõenäoliselt lähiaastatel ei juhtu. , kliiniliste PRP-toodete tehnoloogia areneb edasi ning teaduslikud andmed näitavad, et erinevate patoloogiate raviks konkreetsetel tingimustel on vaja erinevaid PRP preparaate.Seetõttu eeldame, et ideaalse PRP tootmise parameetrid ja muutujad kasvavad ka tulevikus.
PRP ettevalmistamise meetod on pooleli
Vastavalt PRP terminoloogiale ja tootekirjeldusele on erinevate PRP koostiste jaoks välja antud mitu klassifikatsioonisüsteemi.Kahjuks puudub üksmeel PRP või mõne muu autoloogse vere ja veretoodete tervikliku klassifikatsioonisüsteemi osas.Ideaalis peaks klassifikatsioonisüsteem pöörama tähelepanu erinevatele PRP tunnustele, definitsioonidele ja asjakohasele nomenklatuurile, mis on seotud konkreetsete haigustega patsientide raviotsustega.Praegu jagavad ortopeedilised rakendused PRP kolme kategooriasse: puhas trombotsüütide rikas fibriin (P-PRF), leukotsüütide rikas PRP (LR-PRP) ja leukotsüütide puudulikkusega PRP (LP-PRP).Kuigi see on spetsiifilisem kui üldine PRP toote määratlus, puudub LR-PRP ja LP-PRP kategooriatel valgete vereliblede sisalduse osas ilmselgelt spetsiifilisus.Tänu oma immuun- ja peremeesorganismi kaitsemehhanismidele on valged verelibled oluliselt mõjutanud krooniliste koehaiguste sisemist bioloogiat.Seetõttu võivad spetsiifilisi valgeid vereliblesid sisaldavad PRP bioloogilised ained märkimisväärselt soodustada immuunregulatsiooni ning kudede paranemist ja regenereerimist.Täpsemalt on PRP-s rohkesti lümfotsüüte, mis toodavad insuliinitaolist kasvufaktorit ja toetavad kudede remodelleerumist.
Monotsüüdid ja makrofaagid mängivad võtmerolli immuunregulatsiooni protsessis ja kudede parandamise mehhanismis.Neutrofiilide tähtsus PRP-s on ebaselge.LP-PRP määrati esimeseks PRP preparaadiks süstemaatilise hindamise teel, et saavutada liigese OA efektiivsed ravitulemused.Siiski Lana et al.LP-PRP kasutamine põlveliigese OA ravis on vastu, mis näitab, et spetsiifilised valged verelibled mängivad olulist rolli põletikulises protsessis enne koe regeneratsiooni, kuna vabastavad põletikueelseid ja põletikuvastaseid molekule.Nad leidsid, et neutrofiilide ja aktiveeritud trombotsüütide kombinatsioonil oli kudede paranemisele rohkem positiivseid kui negatiivseid mõjusid.Samuti juhtisid nad tähelepanu sellele, et monotsüütide plastilisus on oluline kudede parandamise mittepõletikulise ja parandava funktsiooni jaoks.
Aruanne PRP ettevalmistamise skeemi kohta kliinilistes uuringutes on väga ebajärjekindel.Enamik avaldatud uuringuid ei ole välja pakkunud skeemi korratavuse tagamiseks vajalikku PRP valmistamismeetodit.Ravi näidustuste vahel puudub selge konsensus, mistõttu on raske võrrelda PRP tooteid ja nendega seotud ravitulemusi.Enamikul teatatud juhtudest klassifitseeritakse trombotsüütide kontsentratsiooniravi termini "PRP" alla, isegi sama kliinilise näidustuse korral.Mõnes meditsiinivaldkonnas (nagu OA ja tendinoos) on tehtud edusamme PRP preparaatide, manustamisviiside, trombotsüütide funktsiooni ja muude kudede paranemist ja kudede regeneratsiooni mõjutavate PRP komponentide muutuste mõistmisel.Siiski on vaja täiendavaid uuringuid, et jõuda üksmeelele PRP bioloogiliste mõjuritega seotud PRP terminoloogias, et teatud patoloogiaid ja haigusi täielikult ja ohutult ravida.
PRP klassifikatsioonisüsteemi staatus
Autoloogse PRP bioteraapia kasutamist häirib PRP preparaatide heterogeensus, ebajärjekindel nimetamine ja tõenduspõhiste juhiste halb standardimine (st kliinilise ravi viaalide valmistamiseks on palju ettevalmistusmeetodeid).Võib ennustada, et PRP ja sellega seotud toodete absoluutne PRP sisaldus, puhtus ja bioloogilised omadused on väga erinevad ning mõjutavad bioloogilist efektiivsust ja kliiniliste uuringute tulemusi.PRP ettevalmistusseadme valik tutvustab esimest võtmemuutujat.Kliinilises regeneratiivses meditsiinis saavad praktikud kasutada kahte erinevat PRP ettevalmistamise seadet ja meetodit.Preparaat kasutab standardset vererakkude eraldajat, mis toimib enda kogutud täisverega.See meetod kasutab pideva vooluga tsentrifuugitrumli või ketta eraldamise tehnoloogiat ning kõva ja pehme tsentrifuugi etappe.Enamikku neist seadmetest kasutatakse kirurgias.Teine meetod on gravitatsiooni tsentrifugaaltehnoloogia ja seadmete kasutamine.Suure G-jõuga tsentrifuugimist kasutatakse ESR-i kollase kihi eraldamiseks vereliistakuid ja valgeid vereliblesid sisaldavast vereühikust.Need kontsentreerimisseadmed on väiksemad kui vererakkude eraldajad ja neid saab kasutada voodi kõrval.Erinevus ģ – jõud ja tsentrifuugimisaeg põhjustavad olulisi erinevusi isoleeritud trombotsüütide saagises, kontsentratsioonis, puhtuses, elujõulisuses ja aktiveeritud olekus.Viimases kategoorias saab kasutada mitut tüüpi kaubanduslikke PRP ettevalmistusseadmeid, mille tulemuseks on edasised muudatused toote sisus.
Üksmeele puudumine PRP valmistamismeetodi ja valideerimise osas põhjustab jätkuvalt PRP-ravi ebajärjekindlust ning PRP ettevalmistamises, proovide kvaliteedis ja kliinilistes tulemustes on suuri erinevusi.Olemasolevad kaubanduslikud PRP-seadmed on kontrollitud ja registreeritud vastavalt patenteeritud tootja spetsifikatsioonidele, mis lahendab praegu saadaolevate PRP-seadmete erinevad muutujad.
Mõistke trombotsüütide annust in vitro ja in vivo
PRP ja teiste trombotsüütide kontsentraatide terapeutiline toime tuleneb erinevate kudede parandamise ja regenereerimisega seotud tegurite vabanemisest.Pärast trombotsüütide aktiveerimist moodustavad trombotsüütide trombid, mis toimib ajutise rakuvälise maatriksina, mis soodustab rakkude proliferatsiooni ja diferentseerumist.Seetõttu on õiglane eeldada, et trombotsüütide suurem annus toob kaasa trombotsüütide bioaktiivsete tegurite suurema lokaalse kontsentratsiooni.Korrelatsioon trombotsüütide annuse ja kontsentratsiooni ning vabanenud trombotsüütide bioaktiivse kasvufaktori ja ravimi kontsentratsiooni vahel võib aga olla kontrollimatu, kuna üksikute patsientide trombotsüütide arvu algväärtuses on olulisi erinevusi ning PRP valmistamise meetodite vahel on erinevusi.Samamoodi on PRP plasmaosas mitu koe parandamise mehhanismi kaasatud trombotsüütide kasvufaktorit (näiteks maksa kasvufaktor ja insuliinitaoline kasvufaktor 1).Seetõttu ei mõjuta suurem trombotsüütide annus nende kasvufaktorite paranemispotentsiaali.
In vitro PRP-uuringud on väga populaarsed, kuna nende uuringute erinevaid parameetreid saab täpselt kontrollida ja tulemusi saab kiiresti.Mitmed uuringud on näidanud, et rakud reageerivad PRP-le annusest sõltuval viisil.Nguyen ja Pham näitasid, et GF-i väga kõrge kontsentratsioon ei pruugi rakkude stimuleerimise protsessi soodustada, mis võib olla kahjulik.Mõned in vitro uuringud on näidanud, et kõrgel PGF-i kontsentratsioonil võib olla kahjulik mõju.Üks põhjus võib olla rakumembraani retseptorite piiratud arv.Seega, kui PGF-i tase on olemasolevate retseptoritega võrreldes liiga kõrge, avaldavad need raku funktsioonile negatiivset mõju.
Trombotsüütide kontsentratsiooni andmete tähtsus in vitro
Kuigi in vitro uuringutel on palju eeliseid, on sellel ka mõningaid puudusi.In vitro on paljude erinevate rakutüüpide pideva interaktsiooni tõttu mis tahes koes, mis on tingitud koestruktuurist ja rakulisest koest, kahemõõtmelises ühekultuurilises keskkonnas in vitro paljunemine keeruline.Rakkude tihedus, mis võib mõjutada raku signaali rada, on tavaliselt alla 1% koe seisundist.Kahemõõtmeline kultiveerimisnõu kude takistab rakkude kokkupuudet ekstratsellulaarse maatriksiga (ECM).Lisaks põhjustab tüüpiline kultiveerimistehnoloogia rakujäätmete kogunemist ja pidevat toitainete tarbimist.Seetõttu erineb in vitro kultuur mis tahes püsiseisundist, kudede hapnikuvarustusest või söötme äkilisest vahetusest ning on avaldatud vastuolulisi tulemusi, milles võrreldakse PRP kliinilist toimet spetsiifiliste rakkude, koetüüpide ja trombotsüütide in vitro uuringuga. kontsentratsioonid.Graziani ja teised.Leiti, et in vitro saavutati suurim mõju osteoblastide ja fibroblastide proliferatsioonile PRP trombotsüütide kontsentratsioonil, mis oli 2,5 korda suurem kui algväärtus.Seevastu Parki ja kolleegide esitatud kliinilised andmed näitasid, et pärast lülisamba sulandumist tuleb positiivsete tulemuste saamiseks tõsta PRP trombotsüütide taset rohkem kui 5 korda algtasemest.Sarnastest vastuolulistest tulemustest teatati ka kõõluste in vitro proliferatsiooni andmete ja kliiniliste tulemuste vahel.
(Selle artikli sisu trükitakse uuesti ja me ei anna selles artiklis sisalduva sisu täpsuse, usaldusväärsuse või täielikkuse eest otsest ega kaudset garantiid ega vastuta selle artikli arvamuste eest, palun mõistke.)
Postitusaeg: 01.03.2023