Kaasaegne PRP: “kliiniline PRP”
Viimase 10 aasta jooksul on PRP raviskeem läbi teinud suuri muutusi.Eksperimentaalsete ja kliiniliste uuringute kaudu on meil nüüd parem arusaam trombotsüütide ja muu raku füsioloogiast.Lisaks on paljude meditsiiniliste valdkondade, sealhulgas dermatoloogia, südameoperatsiooni, plastilise kirurgia, ortopeedilise kirurgia, valuoperatsioonide, valuhaiguse, seljaaju haiguste ja spordiravimite tõhusust näidanud mitmed kvaliteetsed süstemaatilised hinnangud, metaanalüüsid ja randomiseeritud kontrollitud uuringud PRP biotehnoloogia tõhusust paljudes meditsiinilistes valdkondades, sealhulgas südameoperatsioon, plastiline kirurgia, ortopeediline kirurgia, valuravi, selgroohaigused ja spordiravimid. .
PRP praeguseks omaduseks on selle absoluutne trombotsüütide kontsentratsioon, mis muutub PRP esialgsest määratlusest (sealhulgas trombotsüütide kontsentratsioon kõrgem kui algväärtus) kuni enam kui 1 × 10 6/µ L või umbes 5 korda suurem kui minimaalne trombotsüütide kontsentratsioon trombotsüütides alates trombotsüütidest lähtejoon.Fadadu jt ulatuslikus ülevaates.Hinnati 33 PRP -süsteemi ja protokolle.Mõne sellise süsteemi toodetud lõpliku PRP preparaadi trombotsüütide arv on madalam kui terve vere oma.Nad teatasid, et PRP trombotsüütide tegur kasvas ühe spinni komplektiga (Selphyl®) nii madalaks kui 0,52.Seevastu topelt pöörlemiskuulutus Emcyte Genesis PurePRPII ® on seadme toodetud trombotsüütide kontsentratsioon kõrgeim (1,6 × 10 6 /µL).
Ilmselt ei ole in vitro ja loomade meetodid ideaalsed uurimiskeskkonnad edukaks muutmiseks kliiniliseks praktikas.Sarnaselt ei toeta seadme võrdlusuuring otsust, kuna need näitavad, et trombotsüütide kontsentratsioon PRP -seadmete vahel on väga erinev.Õnneks saame proteoomikapõhise tehnoloogia ja analüüsi kaudu suurendada oma arusaamist raku funktsioonidest PRP -s, mis mõjutavad ravitulemusi.Enne konsensuse saavutamist standardiseeritud PRP preparaatide ja preparaatide osas peaks PRP järgima kliinilisi PRP preparaate, et edendada olulisi kudede parandamise mehhanisme ja progresseeruvaid kliinilisi tulemusi.
Kliiniline PRP valem
Praegu on efektiivset kliinilist PRP-d (C-PRP) iseloomustatud autoloogsete mitmerakuliste komponentide keeruka koostisena väikese mahuga plasmas, mis on saadud perifeerse vere osast pärast tsentrifuugimist.Pärast tsentrifuugimist saab PRP ja selle mitteplaatide rakukomponente kontsentratsiooniseadmest taastada vastavalt erinevatele rakutihedustele (millest trombotsüütide tihedus on madalaim).
Pärast kahte tsentrifuugimisprotseduuri kasutati PUREPRP-SP ® rakkude tiheduse eraldamise seadmeid (Emcyte Corporation, Fort Myers, FL, USA).Pärast esimest tsentrifuugimisprotsessi eraldati terve vere komponent kaheks põhikihiks, trombotsüütide (lahja) plasmasuspensioon ja punase verelible kiht.A -s on teine tsentrifuugimisetapp lõpule viidud.Tegeliku PRP mahu saab patsiendi kasutamiseks kaevandada.B-suurendus näitab, et seadme põhjas on organiseeritud mitmekomponendiline erütrotsüütide setted pruuni kiht (tähistatud sinise joonega), mis sisaldab tihedusgradiendil põhinevaid trombotsüütide, monotsüütide ja lümfotsüütide kõrgeid kontsentratsioone.Selles näites ekstraheeritakse halva neutrofiilidega C-PRP ettevalmistamise protokolli kohaselt neutrofiilide (<0,3%) ja erütrotsüütide (<0,1%) minimaalne protsent.
Trombotsüütide graanul
Varases kliinilises PRP-rakenduses on α-graanulid kõige sagedamini viidatud trombotsüütide sisemisest struktuurist, kuna need sisaldavad hüübimisfaktoreid, suurt hulka PDGF-i ja angiogeenseid regulaatoreid, kuid neil on vähe trombogeenset funktsiooni.Muud tegurid hõlmavad vähem tuntud kemokiini- ja tsütokiini komponente, näiteks trombotsüütide faktor 4 (PF4), plateotsüütideelne põhivalk, p-selektiin (integriini aktivaator) ja kemokiini Rante (reguleeritud aktiveerimisega, ekspresseerides normaalseid T-rakke ja arvatavasti normaalset T-rakke ja arvatavasti sekretär).Nende spetsiifiliste trombotsüütide graanulite komponentide üldine funktsioon on teiste immuunrakkude värbamine ja aktiveerimine või endoteelirakkude põletiku esilekutsumine.
Tihedaid granuleeritud komponente nagu ADP, serotoniin, polüfosfaat, histamiin ja adrenaliin kasutatakse kaudselt trombotsüütide aktiveerimise ja tromboosi regulaatoritena.Kõige tähtsam on see, et paljudel neist elementidest on funktsioon immuunrakkude modifitseerimisel.Trombotsüütide ADP -d tunneb P2Y12ADP retseptori abil dendriitrakkudel (DC), suurendades sellega antigeeni endotsütoosi.DC (antigeeni esinev rakku) on väga oluline T -rakkude immuunvastuse algatamiseks ja kaitsva immuunvastuse kontrollimiseks, mis seob kaasasündinud immuunsussüsteemi ja adaptiivse immuunsussüsteemi.Lisaks saadab trombotsüütide adenosiin trifosfaat (ATP) signaale T -raku retseptori P2X7 kaudu, põhjustades CD4 T abistajarakkude diferentseerumise suurenemist põletikuvastasteks T abistajaks 17 (Th17) rakkudeks.Teised trombotsüütide tihedad graanulite komponendid (näiteks glutamaat ja serotoniin) kutsuvad esile T -rakkude migratsiooni ja suurendavad vastavalt Monotsüütide diferentseerumist alalisvooluks.PRP -s on need tihedatest osakestest saadud immunomodulaatorid väga rikastatud ja neil on olulised immuunfunktsioonid.
Trombotsüütide ja muude (retseptori) rakkude vaheliste ja kaudsete potentsiaalsete interaktsioonide arv on ulatuslik.Seetõttu võib PRP kasutamine kohalikus patoloogilises kudede keskkonnas esile kutsuda mitmesuguseid põletikulisi mõjusid.
Trombotsüütide kontsentratsioon
C-PRP peaks sisaldama kontsentreeritud trombotsüütide kliinilisi annuseid, et saada kasulikke terapeutilisi toimeid.C-PRP-i trombotsüüdid peaksid stimuleerima rakkude proliferatsiooni, mesenhümaalsete ja neurotroofsete tegurite sünteesi, soodustavad kemotaktiliste rakkude migratsiooni ja stimuleerima immunoregulatoorset aktiivsust, nagu on näidatud joonisel.
Aktiveeritud trombotsüüdid, PGF -i ja adhesioonimolekulide vabanemine vahendavad mitmesuguseid rakkude interaktsioone: kemotaksis, rakkude adhesioon, migratsioon ja rakkude diferentseerimine ning reguleerige immuunregulatsiooni.Need trombotsüütide raku-rakkude interaktsioonid aitavad kaasa angiogeneesile ja põletikulisele aktiivsusele ning stimuleerivad lõpuks kudede parandamise protsessi.Lühendid: BMA: Luuüdi aspiraat, EPC: endoteeli eellasrakud, EC: endoteelirakud, 5-HT: 5-hüdroksütrüptamiin, Rantes: Rantes: Normaalse T-raku ekspressiooni ja oletatava sekretsiooni aktiveeritud reguleerimine, jam: ristmiku molekuli tüüp, CD40L: CD40L: klaster 40 ligand, SDF-1 α ： Stromaalrakkudest saadud faktorist 1 α α α ， CXCL: kemokiin (CXC motiiv) ligand, PF4: trombotsüütide tegur 4. kohandatud Everts et al.
Marx oli esimene inimene, kes tõestas, et luu- ja pehmete kudede paranemine oli tugevnenud, ning minimaalne trombotsüütide arv oli 1 × 10 6 /µL。 Need tulemused kinnitati nimmepiirkonna sulandumise uuringus lülisamba fooramenide kaudu, kui trombotsüütide annus oli suurem kui suurem kui suurem kui trombotsüüti 1,3 × 106 trombotsüüti/µ L juures näitas see uuring rohkem sulandumist.Lisaks on Giusti jt.Kudede parandamise mehhanism 1,5 × 109 annuses nõuab trombotsüüte/ml funktsionaalse angiogeneesi esilekutsumiseks endoteelirakkude aktiivsuse kaudu.Viimases uuringus vähendasid kõrgemad kontsentratsioonid trombotsüütide angiogeneesi potentsiaali folliikulite ja selle ümber.Lisaks näitasid varasemad andmed, et PRP annus mõjutaks ka ravitulemusi.Seetõttu võib C-PRP sisaldada 5-ml PRP-ravi pudelis × 10 9, et angiogeneesi reaktsiooni märkimisväärseks esilekutsumiseks ja rakkude proliferatsiooni ja rakkude migratsiooni stimuleerimiseks võib tekkida 5-ml PRP-ravi pudelis × 10 9.
Lisaks annusest sõltuvusele näib PRP mõju rakkude aktiivsusele väga sõltuv.Sophie jt.Need tulemused viitavad sellele, et lühiajaline kokkupuude inimese trombotsüütide lüsaatidega võib stimuleerida luurakkude proliferatsiooni ja kemotaksist.Vastupidi, pikaajaline kokkupuude PRP-ga põhjustab aluselise fosfataasi ja mineraalide moodustumise madalamat taset.
punane verelible
Punased verelibled vastutavad hapniku transportimise eest kudedesse ja süsinikdioksiidi kudedest kopsudesse ülekandmise eest.Neil pole tuuma ja need koosnevad heemimolekulidest, mis seovad valkudega.Punaste vereliblede raua- ja heemikomponendid soodustavad hapniku ja süsinikdioksiidi kombinatsiooni.Üldiselt on punaste vereliblede elutsükkel umbes 120 päeva.Need eemaldatakse vereringest makrofaagide abil, mida nimetatakse RBC vananemiseks.PRP-proovide punased verelibled võivad kahjustada nihketingimustes (näiteks terve vere verejooksu operatsioon, immuunvahendatud protsess, oksüdatiivne stress või ebapiisav PRP kontsentratsiooniskeem).Seetõttu laguneb ja vabastab RBC rakumembraan toksilise hemoglobiini (HB), mõõdetuna plasmavaba hemoglobiini (PFH), heemi ja raua abil.]PFH ja selle lagunemisproduktid (heem ja raud) põhjustavad ühiselt kahjulikke ja tsütotoksilisi toimeid kudedele, põhjustades oksüdatiivset stressi, lämmastikoksiidi kadu, põletikuliste radade aktiveerimist ja immunosupressiooni.Need mõjud põhjustavad lõpuks mikrotsirkulatsiooni talitlushäireid, lokaalset vasokonstriktsiooni ja veresoonte vigastusi, samuti tõsiseid kudede kahjustusi.
Kõige olulisem on see, et kui C-PRP sisaldav RBC koesse toimetatakse, põhjustab see lokaalset reaktsiooni, mida nimetatakse erüptosiks, mis käivitab efektiivse tsütokiini ja makrofaagide migratsiooni inhibiitori vabanemise.See tsütokiin pärsib monotsüütide ja makrofaagide migratsiooni.See avaldab tugevaid põletikulisi signaale ümbritsevatele kudedele, pärsib tüvirakkude migratsiooni ja fibroblastide proliferatsiooni ning põhjustab olulist lokaalse raku düsfunktsiooni.Seetõttu on oluline piirata RBC saastumist PRP preparaatides.Lisaks pole punaste vereliblede rolli kudede regenereerimisel kunagi kindlaks tehtud.Piisav C-PRP tsentrifuugimine ja ettevalmistamise protsess vähendavad või elimineerivad tavaliselt punaste vereliblede olemasolu, vältides seega hemolüüsi ja polütsüteemia kahjulikke tagajärgi.
Leukotsüüdid C-prp-s
Valgete vereliblede olemasolu PRP preparaatides sõltub ravivarustusest ja ettevalmistamise skeemist.Plasmapõhistes PRP-seadmetes elimineeritakse valged verelibled täielikult;Valged verelibled kontsentreeriti siiski märkimisväärselt erütrotsüütide settepruuni kihi PRP valmistamisel.Immuun- ja peremeesorganismi kaitsemehhanismide tõttu mõjutavad valged verelibled suuresti ägedate ja krooniliste kudede tingimuste sisemist bioloogiat.Neid funktsioone arutatakse allpool.Seetõttu võib spetsiifiliste leukotsüütide olemasolu C-PRP-s põhjustada olulist raku- ja kudede toimet.Täpsemalt kasutavad erinevad PRP erütrotsüütide setted pruunide kollase kihi süsteemid erinevaid ettevalmistusskeeme, tootes PRP-s erineva osa neutrofiile, lümfotsüüte ja monotsüüte.Eosinofiile ja basofiile ei saa PRP preparaatides mõõta, kuna nende rakumembraanid on tsentrifugaalse töötlemisjõudude talumiseks liiga habras.
Neutrofiilid
Neutrofiilid on olulised leukotsüüdid paljudes tervendamistel.Need rajad ühendavad trombotsüütides esinevaid antimikroobseid valke, moodustades tiheda barjääri invasiivsete patogeenide vastu.Neutrofiilide olemasolu määratakse vastavalt C-PRP ravieesmärgile.Kroonilise haavahoolduse PRP bioteraapias või luude kasvule või paranemisele suunatud rakendustes võib olla vajalik kudede põletiku tõus.Oluline on see, et mitmest mudelist on leitud täiendavaid neutrofiilide funktsioone, rõhutades nende rolli angiogeneesis ja kudede parandamisel.Kuid neutrofiilid võivad põhjustada ka kahjulikke mõjusid, nii et need ei sobi mõne rakenduse jaoks.Zhou ja Wang tõestasid, et PRP -rikaste neutrofiilide kasutamine võib põhjustada III tüüpi kollageeni ja I tüüpi kollageeni suhte suurenemist, süvendades sellega fibroosi ja vähendades kõõluste tugevust.Muud neutrofiilide vahendatud kahjulikud omadused on põletikuliste tsütokiinide ja maatriksi metalloproteinaaside (MMP) vabanemine, mis võib kudedes rakendamisel soodustada põletikku ja katabolismi.
Leukomonotsüüt
C-PRP-s on mononukleaarsed T ja B lümfotsüüdid kontsentreeritud kui ükski teine valge verelible.Need on tihedalt seotud rakkude vahendatud tsütotoksilise adaptiivse immuunsusega.Lümfotsüüdid võivad põhjustada rakkude reaktsioone nakkuse vastu võitlemiseks ja sissetungijatega kohanemiseks.Lisaks suurendavad T-lümfotsüütidest saadud tsütokiinid (interferoon-γ [IFN-γ] ja interleukiin-4 (IL-4)) makrofaagide polarisatsiooni. Versar jt. See on tõestatud, et tavalised T-lümfotsüüdid võivad kaudselt soodustada kudede paranemist kudede paranemist koede paranemisel koede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel soodustab kudede paranemist kudede koede koede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede koede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel kudede paranemisel soodustama koede koede paranemist kudede paranemisega. Hiiremudel, reguleerides monotsüütide ja makrofaagide diferentseerumist.
Monotsüüt - mitmekülgne parandusrakk
Kasutatud PRP ettevalmistamise seadme kohaselt võivad monotsüüdid PRP -ravipudelis välja jõuda või neid ei eksisteerita.Kahjuks käsitletakse nende esinemis- ja taaselustamise võimet kirjanduses harva.Seetõttu pööratakse ettevalmistusmeetodis või lõplikus valemis monotsüütidele vähe tähelepanu.Monotsüütide rühm on heterogeenne, pärineb luuüdis olevatest eellasrakkudest ja transporditakse perifeersetesse kudedesse hematopoeetilise tüvirakkude raja kaudu vastavalt mikrokeskkonna stimuleerimisele.Homöostaasi ja põletiku ajal lahkuvad tsirkuleerivad monotsüüdid vereringest ja värvatakse vigastatud või lagunenud kudedesse.Need võivad toimida makrofaagide (M φ) efektorrakkude või eellasrakkudena.Monotsüüdid, makrofaagid ja dendriitrakud tähistavad mononukleaarset fagotsüütilist süsteemi (MPS). MPS -i tüüpiline omadus on selle geeniekspressioonimustri plastilisus ja nende rakutüüpide funktsionaalne kattuvus.Degenereerunud kudedes algatavad residendist makrofaagid, lokaalselt toimivad kasvufaktorid, põletikuvastased tsütokiinid, apoptootilised või nekrootilised rakud ja mikroobsed tooted monotsüüdid, et diferentseeruda MPS-i rakurühmadeks.Oletame, et kui C-PRP, mis sisaldab kõrge tootlusega monotsüüte, süstitakse haiguse lokaalsesse mikrokeskkonda, diferentseeruvad monotsüüdid tõenäoliselt M φ-ks, et põhjustada rakkude suuri muutusi.
Monotsüüdist M φ muundamise protsessis, spetsiifiline m φ fenotüüp.Viimase kümne aasta jooksul on välja töötatud mudel, mis integreerib M φ. Aktiveerimise keerulist mehhanismi kirjeldatakse kahe vastasse oleku polarisatsioonina: M φ fenotüüp 1 (m φ 1, klassikaline aktiveerimine) ja m φ fenotüüp 2 (M φ φ 2, alternatiivne aktiveerimine).M φ 1 iseloomustab põletikuline tsütokiini sekretsioon (IFN-y) ja lämmastikoksiid, et saada efektiivne patogeeni tapmismehhanism.M φ fenotüüp toodab ka veresoonte endoteeli kasvufaktorit (VEGF) ja fibroblastide kasvufaktorit (FGF).M φ fenotüüp koosneb põletikuvastastest rakkudest, millel on kõrge fagotsütoos.M φ 2 toodavad rakuväliseid maatriksikomponente, angiogeneesi ja kemokiine ning interleukiin 10 (IL-10).Lisaks patogeeni kaitsele võib M φ see vähendada ka põletikku ja soodustada kudede paranemist.On tähelepanuväärne, et M φ 2 on jagatud m in vitro φ 2a 、 m φ 2b ja m φ 2. See sõltub stiimulist.Nende alatüüpide in vivo translatsioon on keeruline, kuna kude võib sisaldada segatud M φ rühmi.Huvitav on see, et kohalike keskkonnasignaalide ja IL-4 taseme põhjal saab põletikulise M φ 1 teisendada, et soodustada nendest andmetest paranemist M φ 2。, mõistlik on eeldada, et monotsüütide ja M φ C-PRP preparaatide kontsentratsioonid on kõrged kontsentratsioonid. Võib aidata kaasa kudede paremale paranemisele, kuna neil on põletikuvastane kudede parandamine ja rakkude signaali ülekandevõimalused.
Valge vereliblede fraktsiooni segane määratlus PRP -s
Valgete vereliblede esinemine PRP -ravi pudelites sõltub PRP ettevalmistamise seadmest ja neil võib olla olulisi erinevusi.Leukotsüütide olemasolu ja nende panuse erinevatesse alam-PRP toodete (näiteks PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF ja L-PRF) kohta on palju vaidlusi hiljutises vaidlustes, kuus randomiseeriti, kuus randomiseeriti kuus. Kontrollitud uuringud (tõendusmaterjal 1) ja kolm perspektiivset võrdlusuuringut (tõendusmaterjal 2) osalesid 1055 patsienti, mis näitavad, et LR-PRP ja LP-PRP oli sarnane ohutus.Autor jõudis järeldusele, et PRP kõrvaltoime ei pruugi olla otseselt seotud valgete vereliblede kontsentratsiooniga.Ühes teises uuringus ei muutnud LR-PRP põletikulist interleukiini (IL-1) OA põlve β 、 IL-6, IL-8 ja IL-17).Need tulemused toetavad seisukohta, et leukotsüütide roll PRP bioloogilises aktiivsuses in vivo võib pärineda trombotsüütide ja leukotsüütide vahelisest ristist.See interaktsioon võib soodustada muude tegurite (näiteks lipoksügeen) biosünteesi, mis võib korvata või soodustada põletiku regressiooni.Pärast põletikuliste molekulide (arahhidoonhape, leukotrieen ja prostaglandiin) esialgset vabanemist vabaneb neutrofiilide aktiveerimise vältimiseks aktiveeritud trombotsüütidest lipoksügen A4.Just selles keskkonnas on M φ fenotüüp M φ 1-st lülitile M φ 2。, lisaks on üha rohkem tõendeid selle kohta, et tsirkuleerivad mononukleaarsed rakud võivad nende pluripotentsuse tõttu eristuda mitmesugusteks mittefagotsüütilisteks rakutüüpideks.
PRP tüüp mõjutab MSC kultuuri.Võrreldes puhta PRP või PPP proovidega võib LR-PRP esile kutsuda luuüdist saadud MSC-de (BMMSC) märkimisväärselt suuremat vohamist, kiiremini vabanedes ja parema PGF-i bioloogilise aktiivsusega.Kõik need omadused soodustavad monotsüütide lisamist PRP -ravipudelisse ning nende immunomoduleeriva võime ja diferentseerumispotentsiaali äratundmist.
PRP kaasasündinud ja adaptiivne immuunregulatsioon
Trombotsüütide kuulsaim füsioloogiline funktsioon on verejooksu kontrollimine.Need kogunevad kudede kahjustuste kohas ja kahjustatud veresoontesse.Need sündmused on põhjustatud integriinide ja valimiinide ekspressioonist, mis stimuleerivad trombotsüütide adhesiooni ja agregatsiooni.Kahjustatud endoteelik süvendab seda protsessi veelgi ning paljastatud kollageeni ja muud subendoteliaalsete maatriksi valgud soodustavad trombotsüütide sügavat aktiveerimist.Nendel juhtudel on tõestatud von Willebrandi teguri (VWF) ja glükoproteiini (GP), eriti GP-IB, vastastikmõju olulist rolli.Pärast trombotsüütide aktiveerimist reguleerivad trombotsüütide α-、 tihedad, lüsosoomid ja T-granulid eksotsütoosi ja vabastavad nende sisu rakuvälisse keskkonda.
Trombotsüütide adhesioonimolekul
PRP rolli paremaks mõistmiseks põletikulistes kudedes ja trombotsüütides peaksime mõistma, kuidas erinevad trombotsüütide pinnaretseptorid (integriinid) ja ristmike adhesioonimolekulid (jam) ja rakkude interaktsioonid võivad algatada kriitilisi protsesse kaasasündinud ja adaptiivses immuunsuses.
Integriinid on raku pinna adhesioonimolekulid, mida leiduvad erinevates rakutüüpides ja mida ekspresseeritakse suurtes kogustes trombotsüütides.Integriinide hulka kuuluvad A5B1, A6B1, A2B1 LFA-2, (GPIA/IIA) ja AIIBB3 (GPIIB/IIIA).Tavaliselt eksisteerivad need staatilises ja madala afiinsuses.Pärast aktiveerimist vahetuvad nad kõrge ligandi sidumise afiinsuse olekule.Integriinidel on trombotsüütidel erinevad funktsioonid ja nad osalevad trombotsüütide interaktsioonis mitut tüüpi valgete vereliblede, endoteelirakkude ja rakuvälise maatriksiga.Lisaks ekspresseeritakse GP-IB-V-IX kompleks trombotsüütide membraanil ja on peamine retseptor VON VWF-iga seondumiseks.See interaktsioon vahendab trombotsüütide ja paljastatud subendoteeli struktuuride vahelist esialgset kontakti.Trombotsüütide integriin ja GP kompleks on seotud erinevate põletikuliste protsessidega ja mängivad olulist rolli trombotsüütide-leukotsüütide kompleksi moodustamisel.Täpsemalt, integriin AIIBB3 on vajalik stabiilse kompleksi moodustamiseks, ühendades fibrinogeeni makrofaagi 1 antigeeni (MAC-1) retseptoriga neutrofiilidel.
Trombotsüüdid, neutrofiilid ja veresoonkonna endoteelirakud ekspresseerivad spetsiifilisi raku adhesioonimolekule, mida nimetatakse Seleciiniks.Põletikulistes tingimustes ekspresseerivad trombotsüüdid p-selektiini ja neutrofiili L-selektiini.Pärast trombotsüütide aktiveerimist võib P-selektiin seostuda ligandi PSGL-1-ga, mis eksisteerib neutrofiilidel ja monotsüütidel.Lisaks algatab PSGL-1 seondumine rakusisese signaali kaskaadireaktsiooni, mis aktiveerib neutrofiilid neutrofiilide integriini MAC-1 ja lümfotsüütide funktsiooniga seotud antigeeni 1 kaudu (LFA-1).Aktiveeritud Mac-1 seostub fibrinogeeni kaudu trombotsüütidel GPIB või GPIIB/IIIA-ga, stabiliseerides sellega neutrofiilide ja trombotsüütide vastastikmõju.Lisaks võib aktiveeritud LFA-1 kombineerida trombotsüütidevahelise adhesioonimolekuliga 2, et stabiliseerida neutrofiilide-plateti kompleksi veelgi, et soodustada rakkudega pikaajalist adhesiooni.
Trombotsüüdid ja leukotsüüdid mängivad võtmerolli kaasasündinud ja adaptiivsetes immuunvastustes
Keha suudab ära tunda võõrkehad ja vigastatud kuded ägedate või krooniliste haiguste korral, et algatada haava paranemise kaskaadireaktsioon ja põletikuline rada.Kaasasündinud ja adaptiivsed immuunsussüsteemid kaitsevad peremeesorganismi nakkuse eest ning valged verelibled mängivad olulist rolli kahe süsteemi kattumisel.Täpsemalt mängivad kaasasündinud süsteemis võtmerolli monotsüüdid, makrofaagid, neutrofiilid ja looduslikud tapjarakud, samas kui lümfotsüüdid ja nende alamhulgad mängivad sarnast rolli adaptiivses immuunsussüsteemis.
Trombotsüütide ja leukotsüütide interaktsioonid kaasasündinud immuunrakkude interaktsioonides.Trombotsüüdid interakteeruvad neutrofiilide ja monotsüütidega ning lõpuks M φ -ga interakteeruvad, reguleerige ja suurendage nende efektorfunktsioone.Need trombotsüütide-leukotsüütide interaktsioonid põhjustavad erinevate mehhanismide, sealhulgas netoosi kaudu põletikku.Lühendid: MPO: Müeloperoksüdaas, ROS: Reaktiivsed hapniku liigid, TF: koefaktor, net: neutrofiilide rakuväline lõks, NF-κ B: tuumafaktor Kappa B, M φ ： makrofaagid.
Kaasasündinud immuunsussüsteem
Kaasasündinud immuunsussüsteemi roll on mittespetsiifiline tuvastada invasiivseid mikroorganisme või kudede fragmente ja stimuleerida nende kliirensit.Kui teatud molekulaarsed struktuurid, mida nimetatakse pinna ekspressioonimustri tuvastamise retseptorid (PRR), ühendavad patogeeniga seotud molekulaarsed mustrid ja kahjustustega seotud molekulaarsed mustrid, aktiveeritakse kaasasündinud immuunsussüsteem.PRR-e on palju, sealhulgas teemaksu-sarnane retseptor (TLR) ja RIG-1, nagu retseptor (RLR).Need retseptorid saavad aktiveerida peamise transkriptsioonifaktori Kappa B (NF-κ B), see reguleerib ka kaasasündinud ja adaptiivse immuunvastuse mitmeid aspekte.Huvitav on see, et trombotsüüdid ekspresseerivad ka mitmesuguseid immunoregulatoorseid retseptori molekule nende pinnal ja tsütoplasmas, näiteks p-selektiin, transmembraanse valgu CD40 ligand (CD40L), tsütokiinid (näiteks IL-1 β 、 TGF-β quific TLR. . Seetõttu saavad trombotsüüdid suhelda erinevate immuunrakkudega.
Trombotsüütide valge rakkude interaktsioon kaasasündinud immuunsuses
Kui trombotsüüdid sisenevad või tungivad verevoolu või koesse, on trombotsüüdid üks rakkudest, mis tuvastavad endoteeli vigastuse ja mikroobsed patogeenid kõigepealt.Trombotsüütide agregatsioon ja soodustage trombotsüütide agonistide ADP, trombiini ja VWF vabanemist, mille tulemuseks on trombotsüütide aktiveerimine ja trombotsüütide kemokiini retseptorite C, CC, CXC ja CX3C ekspressioon, põhjustades sellega nakatunud kohas või vigastuses trombotsüüte.
Kaasasündinud immuunsussüsteem on geneetiliselt etteantud sissetungijate, nagu viirused, bakterid, parasiidid ja toksiinid või koehaavad ja haavad.See on mittespetsiifiline süsteem, kuna iga patogeen identifitseeritakse võõr- või mitte-iseenesest ja kiiresti asuvateks.Kaasasündinud immuunsussüsteem tugineb valkude ja fagotsüütide komplektile, mis tunnevad ära patogeenide hästi säilinud omadused ja aktiveerivad kiiresti immuunvastuse, et aidata sissetungijaid kõrvaldada, isegi kui peremeesorganism pole kunagi varem konkreetsete patogeenidega kokku puutunud.
Neutrofiilid, monotsüüdid ja dendriitrakud on veres kõige tavalisemad kaasasündinud immuunrakud.Nende värbamine on vajalik piisavaks varajaseks immuunvastuseks.Kui PRP-d kasutatakse regeneratiivses meditsiinis, reguleerib trombotsüütide valgete rakkude interaktsioon põletikku, haavade paranemist ja kudede paranemist.TLR-4 trombotsüütidel stimuleerib trombotsüütide-neutrofiilide interaktsiooni, mis reguleerib niinimetatud leukotsüütide oksüdatiivset purset, reguleerides reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) ja müeloperoksüdaasi (MPO) vabanemist neutrofiilidest.Lisaks viib trombotsüütide-neutrofiilide ja neutrofiilide degranulatsiooni vastastikmõju neutrofiilide-ekstratsellulaarsete lõksude (NET) moodustumiseni.NET -id koosnevad neutrofiilide tuumast ja muudest neutrofiilide rakusisese sisuga, mis võib baktereid hõivata ja tappa netoosi kaudu.NET -ide moodustumine on neutrofiilide oluline tapmismehhanism.
Pärast trombotsüütide aktiveerimist võivad monotsüüdid rännata haigetele ja degeneratiivsetele kudedele, kus nad viivad läbi adhesiooni aktiivsust ja eritavad põletikulisi molekule, mis võivad muuta kemotaksist ja proteolüütilisi omadusi.Lisaks võivad trombotsüüdid indutseerida monotsüütide NF-κ B aktiveerimist, et reguleerida monotsüütide efektorfunktsiooni, mis on põletikulise reageerimise peamine vahendaja ning immuunrakkude aktiveerimine ja diferentseerumine.Trombotsüüdid soodustavad lisaks monotsüütide endogeenset oksüdatiivset purset, et soodustada fagotsüütiliste patogeenide hävitamist.MPO vabanemist vahendab otsene interaktsioon trombotsüütide-monotsüütide CD40L-MAC-1 vahel.Huvitav on see, et kui P-selektiin aktiveerib trombotsüüte ägedates ja kroonilistes põletikulistes kudede tingimustes, võivad trombotsüütidest saadud kemokiinid PF4, Rantes, IL-1 β ja CXCL-12 takistada monotsüütide spontaanset apoptoosi, kuid soodustada nende diferentseerumist makrofaagideks.
Adaptiivne immuunsussüsteem
Pärast seda, kui mittespetsiifiline kaasasündinud immuunsussüsteem tunneb ära mikroobide või kudede kahjustused, võtab konkreetne adaptiivne immuunsussüsteem võimust.Adaptiivsete süsteemide hulka kuuluvad antigeeni siduvad B-lümfotsüüdid (B-rakud) ja tavapärased T-lümfotsüüdid (Treg), mis koordineerivad patogeenide kliirensit.T -rakke saab laias laastus jagada abistaja T -rakkudeks (TH rakud) ja tsütotoksilisteks T -rakkudeks (TC rakud, tuntud ka kui T -tapjarakud).TH -rakud jagunevad veelgi Th1, Th2 ja Th17 rakkudeks, millel on põhifunktsioonid põletikus.Th-rakud võivad eritada põletikulisi tsütokiine (nt IFN-γ 、 TNF-β） ja mitu interleukiini (nt IL-17). Need on eriti tõhusad rakusisese viiruse ja bakterite infektsiooni ennetamisel. TH-rakud stimuleerivad rakke ja diferentseerumist, mis on seotud rakkude proliferatsiooni ja diferentseerumist. immuunvastus. TC -rakud on efektorrakud, mis võivad kõrvaldada sihitud rakusisesed ja rakuvälised mikroorganismid ja rakud.
Huvitav on see, et Th2 rakud toodavad IL-4 ja mõjutavad m φ polarisatsiooni, M φ juhitud regeneratsiooni m φ 2 fenotüüpi, samas kui IFN-γ M φ muutub põletikuliseks M φ 1 fenotüübiks, mis sõltub tsütokiinide annusest ja ajast.Pärast IL-4 aktiveerimist indutseerib M φ 2 Treg-rakke diferentseeruma Th2 rakkudeks ja tekitab seejärel täiendavat IL-4 (positiivne tagasiside ahel).Th -rakud muudavad m φ fenotüüp suunatakse regeneratiivsele fenotüübile vastusena kudede päritolu bioloogilistele ainetele.See mehhanism põhineb tõenditel, et TH -rakud mängivad olulist rolli põletiku ja kudede paranemise kontrollimisel.
Trombotsüütide valge rakkude interaktsioon adaptiivses immuunsuses
Adaptiivne immuunsussüsteem kasutab antigeenispetsiifilisi retseptoreid ja mäletab, et varem esines patogeene ning hävitab need, kui see hiljem peremehega kokku puutub.Need adaptiivsed immuunvastused arenesid siiski aeglaselt.Konias jt.See näitab, et trombotsüütide komponent aitab kaasa riskitaju ja kudede paranemisele ning et trombotsüütide ja leukotsüütide vastastikmõju soodustab adaptiivse immuunvastuse aktiveerimist.
Adaptiivse immuunvastuse ajal soodustavad trombotsüüdid Monotsüütide ja makrofaagide vastuseid alalisvoolu ja NK -rakkude küpsemise kaudu, põhjustades spetsiifilisi T -rakkude ja B -raku vastuseid.Seetõttu mõjutavad trombotsüütide graanulite komponendid otseselt adaptiivset immuunsust, ekspresseerides CD40L - molekuli, mis on hädavajalik adaptiivse immuunvastuse reguleerimiseks.Trombotsüüdid läbi CD40L ei mängi rolli mitte ainult antigeeni esitluses, vaid mõjutavad ka T -rakkude reaktsiooni.Liu et al.Leiti, et trombotsüüdid reguleerivad CD4 T -rakkude vastust keerulisel viisil.See CD4 T-raku alamhulkade diferentsiaalne reguleerimine tähendab, et trombotsüüdid soodustavad CD4 T-rakke, et reageerida põletikulistele stiimulitele, andes sellega tugevaid põletikuvastaseid ja põletikuvastaseid vastuseid.
Trombotsüüdid reguleerivad ka B-rakkude vahendatud adaptiivset vastust mikroobsetele patogeenidele.On hästi teada, et CD40L aktiveeritud CD4 T-rakkudes käivitab B-rakkude CD40, pakkudes teist signaali, mis on vajalik T-rakust sõltuvaks B-lümfotsüütide aktiveerimiseks, järgneva allotüübi muundamise ning B-rakkude diferentseerumiseks ja vohamiseks.Üldiselt näitavad tulemused selgelt trombotsüütide erinevaid funktsioone adaptiivses immuunsuses, mis näitab, et trombotsüüdid ühendavad T-rakkude ja B-rakkude interaktsiooni CD40-CD40L kaudu, suurendades sellega T-rakust sõltuvat B-raku vastust.Lisaks on trombotsüüdid rikkad rakupinna retseptorite poolest, mis võib soodustada trombotsüütide aktiveerimist ja vabastada suure hulga põletikulisi ja bioloogilisi aktiivseid molekule, mida hoitakse erinevates trombotsüütide osakestes, mõjutades sellega kaasasündinud ja adaptiivset immuunvastust.
Trombotsüütidest saadud serotoniini laiendatud roll PRP-s
Serotoniinil (5-hüdroksütrüptamiin, 5-HT) on selge võtmeroll kesknärvisüsteemis (KNS), sealhulgas valu taluvus.Arvatakse, et suurem osa inimese 5-HT-st toodetakse seedetraktis ja seejärel vereringe kaudu, kus seda imenduvad trombotsüüdid serotoniini tagasihaarde transporteri kaudu ja hoitakse tihedates osakestes kõrge kontsentratsiooniga (65 mmol/L).5-HT on tuntud neurotransmitter ja hormoon, mis aitab reguleerida erinevaid neuropsühholoogilisi protsesse kesknärvisüsteemis (keskne 5-HT).Enamik 5-HT on siiski väljaspool kesknärvisüsteemi (perifeerne 5-HT) ja see on seotud mitmete elundite süsteemi süsteemsete ja rakuliste bioloogiliste funktsioonide reguleerimisega, sealhulgas südame-veresoonkonna, kopsu, seedetrakti, urogenitaalsete ja trombotsüütide funktsionaalsüsteemide reguleerimisega.5-HT-l on kontsentratsioonist sõltuv metabolism mitmesugustel rakutüüpidel, sealhulgas adipotsüütidel, epiteelirakkudel ja valged verelibled.Perifeerne 5-HT on ka võimas immuunmodulaator, mis võib ergutada või pärssida põletikku ja mõjutada erinevaid immuunrakke selle spetsiifilise 5-HT retseptori (5HTR) kaudu.
HT parakriin ja autokriinne mehhanism
5-HT aktiivsust vahendab selle interaktsioon 5HTR-iga, mis on seitsme liikmega superperekond (5-HT 1-7) ja vähemalt 14 erinevat retseptori alamtüüpi, sealhulgas hiljuti avastatud liige 5-HT 7, selle perifeerne ja perifeerne ja selle perifeerne ja selle perifeerne ja funktsioon valu raviks.Trombotsüütide degranulatsiooni protsessis eritavad aktiveeritud trombotsüüdid suure hulga trombotsüütidest saadud 5-HT, mis võib soodustada veresoonte kokkutõmbumist ja stimuleerida külgnevate trombotsüütide ja lümfotsüütide aktiveerimist 5-HTR ekspressiooni kaudu endoteelirakkudel, silelihasrakkudel ja silelihasrakkudel, silelihasrakkudes ja immuunrakud.Pacala jt.Uuriti 5-HT mitootilist toimet veresoonte endoteelirakkudele ja määrati kahjustatud veresoonte kasvu soodustamise potentsiaal angiogeneesi stimuleerimisega.Kuidas need protsessid reguleeritakse .Trombotsüütide 5-HT autokriinset funktsiooni pärast trombotsüütide aktiveerimist on kirjeldatud [ref].5-HT vabanemine suurendab trombotsüütide aktiveerimist ja tsirkuleerivate trombotsüütide värbamist, mis viib signaalkaskaadi reaktsioonide aktiveerimiseni ja trombotsüütide reaktsioonivõime toetavate ülesvoolu efektoritega.
Immunomoduleeriv 5-HT efekt
Üha rohkem tõendeid näitab, et serotoniin võib mängida rolli erinevates 5HTR -is kui immuunmodulaator.Vastavalt 5HTR-ile, mis on ekspresseeritud erinevates põletikulises reaktsioonis osalevates leukotsüütides, toimib trombotsüütidest saadud 5-HT immuunregulaatorina nii kaasasündinud kui ka adaptiivsetes immuunsussüsteemides.5-HT võib stimuleerida Tregi proliferatsiooni ja reguleerida B-rakkude, looduslike tapjarakkude ja neutrofiilide funktsioone, värvates DC ja monotsüüte põletikulisse kohta.Värsked uuringud on näidanud, et trombotsüütidest saadud 5-HT võib reguleerida immuunrakkude funktsiooni erinevates tingimustes.Seetõttu võib C-PRP abil trombotsüütide kontsentratsioon suurem kui 1 × 10 6/µ L märkimisväärselt aidata vedada suurtest trombotsüütidest saadud 5-HT kontsentratsiooni koesse.Mikrokeskkonnas, mida iseloomustavad põletikulised komponendid, võib PRP suhelda mitme immuunrakkudega, millel on nendes patoloogiates võtmeroll, mis võib mõjutada kliinilisi tulemusi.
Joonis, mis näitab mitmetahulist 5-HT vastust pärast põletikuliste PRP trombotsüütide aktiveerimist.Pärast trombotsüütide aktiveerimist vabastavad trombotsüüdid oma graanulid, sealhulgas 5-HT tihedates graanulites, millel on lai erinevatele immuunrakkudele, endoteelirakkudele ja silelihasrakkudele lai erinevus.Lühendid: SMC: silelihasrakud, EC: endoteelirakud, Treg: tavalised T-lümfotsüüdid, M ： Makrofaagid, DC: dendriitrakud, IL: interleukiin, IFN-： ： Interferoon y y modifitseeritud ja kohandatud Evertidest jt.ja Hull jt.
PRP analgeetiline mõju
Aktiveeritud trombotsüüdid vabastavad palju põletikuvastaseid ja põletikuvastaseid vahendajaid, mis mitte ainult ei põhjusta valu, vaid vähendab ka põletikku ja valu.Pärast rakendamist muudab PRP tüüpiline trombotsüütide dünaamika mikrokeskkonda enne kudede parandamist ja regenereerimist mitmesuguste keerukate radade kaudu, mis on seotud anabolismi ja katabolismi, rakkude proliferatsiooni, diferentseerumise ja tüvirakkude reguleerimisega.Need PRP omadused viivad PRP rakendamiseni erinevates kliinilistes patoloogilistes seisundites, mis on tavaliselt seotud kroonilise valuga (näiteks spordikahjustus, ortopeediline haigus, seljaajuhaigus ja keeruline krooniline haav), ehkki täpset mehhanismi pole täielikult kindlaks tehtud.
2008. aastal olid Evertz jt.See on esimene randomiseeritud kontrollitud uuring, mis teatab PRP preparaadi analgeetilisest toimest, mis on valmistatud autoloogse erütrotsüütide settekiiruse pruuni kihist ja aktiveeritakse pärast õlaoperatsiooni autoloogse trombiiniga.Nad märkisid visuaalse analoogskaala skooride olulist vähenemist, opioidipõhiste analgeetikumide kasutamist ja edukamat operatsioonijärgset taastusravi.On tähelepanuväärne, et need kajastavad aktiveeritud trombotsüütide analgeetilist toimet ja spekuleerivad 5-HT vabastavate trombotsüütide mehhanismi suhtes.Lühidalt öeldes on trombotsüüdid värskelt valmistatud PRP -s seisma jäänud.Pärast trombotsüütide aktiveerimist otseselt või kaudselt (koefaktor) muudavad trombotsüüdid kuju ja annavad piisavalt vale, et soodustada trombotsüütide agregatsiooni.Seejärel vabastavad nad rakusisesed α- ja tihedad osakesed.Aktiveeritud PRP -ga töödeldud koe tungib PGF, tsütokiinid ja muud trombotsüütide lüsosoomid.Täpsemalt, kui tihedad osakesed vabastavad oma sisu, vabastavad nad suure koguse 5-HT, mis reguleerib valu.C-PRP-s on trombotsüütide kontsentratsioon 5–7 korda suurem kui perifeerses veres.Seetõttu on 5-HT vabanemine trombotsüütidest astronoomiline.Huvitav on see, et Sprott jt.Aruandes täheldati, et pärast nõelravi ja moksibutsiooni oli valu märkimisväärselt leevendatud, 5-HT saadud trombotsüütide kontsentratsioon vähenes märkimisväärselt ja seejärel tõusis plasma tase 5-HT.
Perifeerses, trombotsüüdid, nuumrakud ja endoteelirakud vabastavad kudede vigastuse või kirurgilise trauma ajal endogeense 5-HT.Huvitav on see, et perifeerses piirkonnas tuvastati mitmesuguseid neuronite retseptoreid, mis kinnitasid, et 5-HT võib häirida notsitseptiivset ülekandumist perifeerses piirkonnas.Need uuringud näitavad, et 5-HT võib mõjutada perifeersete kudede notsitseptiivset ülekandumist 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 ja 5-HT7 retseptorite kaudu.
5-HT süsteem tähistab võimsat süsteemi, mis võib pärast kahjulikku stimuleerimist vähendada ja suurendada.Kroonilise valuga patsientidel on teatatud notsitseptiivsete signaalide ja 5-HT-süsteemi muutuste kesksest ja perifeersest regulatsioonist.Viimastel aastatel on suur hulk uuringuid keskendunud 5-HT ja selle vastavate retseptorite rollile kahjuliku teabe töötlemisel ja reguleerimisel, mille tulemuseks on sellised ravimid nagu selektiivsed serotoniini tagasihaarde inhibiitorid (SSRI).See ravim pärsib serotoniini tagasihaardamist presünaptilisteks neuroniteks pärast serotoniini vabanemist.See mõjutab serotoniini kommunikatsiooni kestust ja intensiivsust ning on kroonilise valu alternatiivne ravi.Täiendavad kliinilised uuringud on vajalikud, et selgelt mõista PRP-st saadud 5-HT valu reguleerimise molekulaarset mehhanismi krooniliste ja degeneratiivsete haiguste korral.
PRP võimaliku valuvaigistava mõju lahendamiseks on võimalik pärast valuvaigistava loomamudeli testi lahendamist.Nendes mudelites on võrdlevad statistilised järeldused keerulised, kuna need uuringud sisaldavad liiga palju muutujaid.Sellegipoolest on mõned kliinilised uuringud käsitlenud PRP notsitseptiivset ja analgeetilist toimet.Mitmed uuringud on näidanud, et tendinoosi või rotaatori manseti pisarate ravi saanud patsientidel on vähe valu leevendamist.Seevastu mitmed muud uuringud on näidanud, et PRP võib vähendada kõõluste degeneratsiooni, OA, plantaarse fastsiidi ning muude jalgade ja pahkluu haiguste valu vähendada või isegi kõrvaldada.Trombotsüütide lõplik kontsentratsioon ja bioloogiline rakkude koostis on tuvastatud peamiste PRP omadustena, mis aitavad jälgida järjepidevat analgeetilist toimet pärast PRP rakendamist.Muud muutujad hõlmavad PRP -i kohaletoimetamise meetodit, rakendustehnoloogiat, trombotsüütide aktiveerimise protokolli, vabastatud PGF -i bioloogilist aktiivsuse taset, PRP -i rakenduse kudede tüüpi ja vigastuste tüüp.
On tähelepanuväärne, et Kuffler lahendas PRP potentsiaali kerge või raske kroonilise neuropaatilise valuga patsientidel valu leevendamisel, sekundaarne kahjustatud mitteregeneratiivse närvi suhtes.Selle uuringu eesmärk on uurida, kas neuropaatilist valu saab vähendada või taanduda, kuna PRP soodustab aksonite regenereerimist ja sihtida närvi taaselustamist.Üllataval kombel kõrvaldatakse neuropaatiline valu ikkagi vähemalt kuus aastat pärast operatsiooni.Lisaks hakkasid kõik patsiendid valu leevendama kolme nädala jooksul pärast PRP rakendamist.
Hiljuti on operatsioonijärgse haava ja nahahoolduse valdkonnas täheldatud sarnaseid analgeetilisi PRP -toimeid.Huvitaval kombel teatasid autorid veresoonte vigastuse ja nahakude hüpoksiaga seotud haavavalu füsioloogilistest aspektidest.Samuti arutasid nad angiogeneesi olulisust hapnikuvarustuse ja toitainete kohaletoimetamise optimeerimisel.Nende uuring näitas, et võrreldes kontrollrühmaga oli PRP -ravi saanud patsientidel vähem valu ja märkimisväärselt suurenenud angiogeneesi.Lõpuks viisid Johal ja tema kolleegid läbi süstemaatilise ülevaate ja metaanalüüsi ning järeldasid, et PRP võib pärast PRP kasutamist ortopeedilistes näidustustes valu vähendada, eriti patsientidel, kes saavad välise epikondüliiti ja põlve OA-ravi.Kahjuks ei täpsustatud selles uuringus valgete vereliblede mõju, trombotsüütide kontsentratsiooni ega eksogeensete trombotsüütide aktivaatorite kasutamist, kuna need muutujad mõjutavad PRP üldist tõhusust.Optimaalne PRP trombotsüütide kontsentratsioon maksimaalse valu leevendamiseks on ebaselge.Tendinoosi roti mudelis oli trombotsüütide kontsentratsioon 1 1 1,0 × 10 6 / μ, valu saab täielikult leevendada, samal ajal kui PRP põhjustatud valu leevendamine poolega, mille pool trombotsüütide kontsentratsioonist on märkimisväärselt vähenenud.Seetõttu julgustame rohkem kliinilisi uuringuid uurima erinevate PRP preparaatide analgeetilisi mõjusid.
PRP ja angiogeneesi efekt
C-PRP preparaadid täpses regeneratiivses meditsiinis võimaldavad manustada biomolekulide eraldumist sihtkoe saitidel aktiveeritud trombotsüütide kõrge kontsentratsiooni abil.Seetõttu on algatatud mitmesuguseid kaskaadireaktsioone, mis aitavad kaasa kohapealsele immuunregulatsioonile, põletikulisele protsessile ja angiogeneesile, et soodustada paranemist ja kudede paranemist.
Angiogenees on dünaamiline mitmeastmeline protsess, mis hõlmab olemasolevate veresoonte idanemist ja kudede mikroveresoone.Angiogenees on edenenud mitmesuguste bioloogiliste mehhanismide tõttu, sealhulgas endoteelirakkude migratsiooni, vohamise, diferentseerumise ja jagunemise tõttu.Need rakulised protsessid on uute veresoonte moodustumise eeltingimused.Need on olulised olemasolevate veresoonte kasvuks verevoolu taastamiseks ning kudede paranemise ja kudede regenereerimise kõrge metaboolse aktiivsuse toetamiseks.Need uued veresooned võimaldavad hapnikku ja toitaineid ning töödeldud kudedest kõrvalsaaduste eemaldamist.
Angiogeneesi aktiivsust reguleerib angiogeense faktori VEGF ja angiogeensete tegurite stimuleerimine (nt angiostatiin ja trombospondiin-1 [TSP-1]).Haigestunud ja lagunenud mikrokeskkonnas (sealhulgas madala hapniku pinge, madal pH ja kõrge piimhappe tase) korral taastavad lokaalsed angiogeensed tegurid angiogeneesi aktiivsuse.
Mitmed trombotsüütide lahustuvad söötmed, näiteks põhilised FGF ja TGF-β ja VEGF, võivad stimuleerida endoteelirakke uute veresoonte tootmiseks.Landsdown ja Fortier teatasid mitmesugustest PRP koosseisuga seotud tulemustest, sealhulgas paljude angiogeensete regulaatorite saplatetsükkide allikatest.Lisaks jõudsid nad järeldusele, et angiogeneesi suurenemine aitab kaasa MSK haiguse paranemisele halva vaskularisatsiooniga piirkondades, näiteks meniski pisar, kõõluste vigastus ja muud halva vaskularisatsiooniga piirkonnad.
Soodustavad ja anti-angiogeensed trombotsüütide omadused
Viimastel aastakümnetel on avaldatud uuringud tõestanud, et trombotsüütidel on võtmeroll primaarses hemostaasis, hüübide moodustumises, kasvufaktoris ja tsütokiinide vabanemises ning angiogeneesi regulatsioonis kudede parandamise protsessi osana.Paradoksaalsel kombel sisaldavad PRP α- graanulid pro-angiogeensete kasvufaktorite, angiogeensete valkude ja tsütokiinide (näiteks PF4, plasminogeeni aktivaatori inhibiitor-1 ja TSP-1, arsenali ning suunavad spetsiifiliste tegurite vabanemist, mis mängib rolli, mis on roll .Roll angiogeneesis.Seetõttu võib PRP rolli angiogeneesi reguleerimise kontrollimisel määratleda spetsiifiliste rakupinna retseptorite aktiveerimisega, TGF-β algatab pro-angiogeenseid ja angiogeenseid reaktsioone.Trombotsüütide võimet angiogeneesi rada on kinnitatud patoloogilise angiogeneesi ja kasvaja angiogeneesi korral.
Trombotsüütidest tulenev angiogeenne kasvufaktor ja anti-angiogeenne kasvufaktor, mis on saadud α- ja tihedatest ja kleepuvatest molekulidest.Kõige tähtsam on see, et üldiselt aktsepteeritakse, et trombotsüütide üldine mõju angiogeneesile on angiogeneenne ja stimuleeriv.Eeldatakse, et PRP -ravi kontrollib angiogeneesi esilekutsumist, mis aitab kaasa paljude haiguste, näiteks haavade paranemise ja kudede paranemise raviefektile.PRP manustamine, täpsemalt kõrge kontsentratsiooniga PGF ja teiste trombotsüütide tsütokiinide manustamine, võib esile kutsuda angiogeneesi, angiogeneesi ja arteriogeneesi, kuna stroomarakust saadud faktor 1A seostub CXCR4 retseptoriga endoteeli eellasrakkudel.Bill jt.Arvatakse, et PRP suurendab isheemilist neovaskularisatsiooni, mis võib olla tingitud angiogeneesi, angiogeneesi ja arteriogeneesi stimuleerimisest.Nende in vitro mudelis indutseeriti endoteelirakkude proliferatsioon ja kapillaaride moodustumine suur hulk erinevaid PDG -sid, millest VEGF oli peamine angiogeenne stimulaator.Veel üks oluline ja oluline tegur angiogeneesi raja taastamiseks on sünergia mitme PGF -i vahel.Richardson jt.Tõestati, et angiogeensete tegurite trombotsüütidelt saadud kasvufaktori-BB (PDGF-BB) ja VEGF sünergistlik aktiivsus viis küpse vaskulaarse võrgu kiire moodustumiseni võrreldes individuaalse kasvufaktori aktiivsusega.Nende tegurite kombineeritud mõju kinnitati hiljuti uuringus pikaajalise hüpoperfusiooniga hiirtel ajude tagatise vereringe tugevdamise kohta.
Kõige tähtsam on see, et in vitro uuring mõõtis inimese nabaveeni endoteelirakkude proliferatiivset toimet ja erinevaid trombotsüütide kontsentratsiooni PRP preparaadiseadme valimisel ja trombotsüütide annuse strateegia valimisel ning tulemused näitasid, et optimaalne trombotsüütide doos oli 1,5 × 10 6 trombomist/ μ 50. Angiogeneesi soodustamiseks.Liiga kõrge trombotsüütide kontsentratsioon võib pärssida angiogeneesi protsessi, seega on efekt halb.
Rakkude vananemine, vananemine ja PRP
Rakkude vananemist võivad esile kutsuda erinevad stiimulid.See on protsess, mille käigus rakud lõpetavad jagunemise ja ainulaadsed fenotüüpsed muutused, et vältida kahjustatud rakkude piiramatut kasvu, millel on oluline roll vähktõve ennetamisel.Füsioloogilise vananemise protsessis soodustab rakkude replikatsiooni vananemine ka rakkude vananemist ja MSC -de regenereerimisvõime väheneb.
Vananemise ja rakkude vananemise mõju
In vivo, vananemise ajal vananevad ja kogunevad erinevates kudedes palju rakutüübid, nende hulgas on palju vananevaid rakke.Näib, et vananemisrakkude kogunemine suureneb vanuse, immuunsussüsteemi kahjustuste, kudede kahjustuste või stressiga seotud tegurite suurenemisega.Raku vananemise mehhanism on määratletud kui vanusega seotud haiguste patogeenseks teguriks, näiteks osteoartriit, osteoporoos ja lülisamba intervarotebraalne ketaste degeneratsioon.Erinevad stiimulid süvendavad rakkude vananemist.Vastuseks eritab vanadusega seotud sekretoorne fenotüüp (SASP) valgurakkude ja tsütokiinide kõrgeid kontsentratsioone.See spetsiaalne fenotüüp on seotud vananevate rakkudega, milles need eritavad põletikuliste tsütokiinide (näiteks IL-1, IL-6, IL-8) kõrget taset, kasvufaktoreid (näiteks TGF-β 、 HGF, VEGF, PDGF), MMP ja katepsiin.Võrreldes noortega on SAPS vanusega tõestatud, kuna püsiseisundi protsess hävitatakse, mille tulemuseks on rakkude vananemine ja vähenenud regenereerimisvõime.Täpsemalt liigesehaiguste ja skeletilihaste haiguste korral.Sellega seoses peetakse immuunsuse vananemist oluliseks muutuseks immuunrakkude sekretsioonispektris, mis näitab, et TNF-A, IL-6 ja/või IL-1B kontsentratsioon suureneb, põhjustades madala kvaliteediga kroonilist põletikku.Väärib märkimist, et tüvirakkude düsfunktsioon on seotud ka mitterakuliste autonoomsete mehhanismidega, näiteks vananemisrakkudega, eriti põletikuvastaste ja regeneratiivsete tegurite tootmisega SASP kaudu.
Vastupidi, SASP võib stimuleerida ka külgnevate rakkude plastilisust ja ümberprogrammeerimist.Lisaks saab SASP korraldada suhtluse erinevate immuunvahenditega ja aktiveerida immuunrakud, et soodustada vananevate rakkude kliirensit.Vananevate rakkude rolli ja funktsiooni mõistmine aitab kaasa MSK lihaste ja krooniliste haavade paranemisele ja kudede ümberehitusele.
On tähelepanuväärne, et Ritcka jt.Viidi läbi ulatuslik uuring ning SASP peamine ja kasulik roll rakkude plastilisuse ja kudede regenereerimise soodustamisel ning võeti kasutusele vananevate rakkude mööduva töötlemise kontseptsioon.Nad mainisid ettevaatlikult, et vananemine on peamiselt kasulik ja regeneratiivne protsess.
Rakkude vananemine ja PRP potentsiaal
Kui tüvirakkude arv väheneb, mõjutab vananemine tüvirakkude jõudlust.Sarnaselt vähenevad ka tüvirakkude omadused (näiteks kuivus, vohamine ja diferentseerumine) ka vanusega.Wang ja Nirmala teatasid, et vananemine vähendaks kõõluste raku tüvirakkude omadusi ja kasvufaktori retseptorite arvu.Loomade uuring näitas, et PDGF kontsentratsioon noortel hobustel oli kõrge.Nad jõudsid järeldusele, et GF -retseptorite arvu suurenemine ja GF -i arv noortel inimestel võib olla parem rakulise reageerimine PRP -ravile kui noortel inimestel vanematel inimestel.Need leiud näitavad, miks PRP -ravi võib olla vähem efektiivne või isegi ebaefektiivne eakatel patsientidel, kellel on vähem tüvirakke ja “halb kvaliteet”.On tõestatud, et vananemise kõhre vananemisprotsess on vastupidine ja kondrotsüütide puhkeperiood suureneb pärast PRP süstimist.Jia jt.Seda kasutatakse hiire dermaalsete fibroblastide uurimiseks in vitro fotoageerimisel koos PRP -raviga ja ilma, et selgitada PGF -i rekordite mehhanismi selles mudelis.PRP -rühm näitas otsest mõju rakuvälisele maatriksile, suurenenud I tüüpi kollageenile ja vähendas metalloproteinaaside sünteesi, mis näitab, et PRP võib neutraliseerida rakkude vananemist, ja ka degeneratiivse MSK haiguse korral.
Teises uuringus kasutati PRP -d vananenud hiirtelt vanade luuüdi tüvirakkude kogumiseks.On kindlaks tehtud, et PRP suudab vananemisest mitmesuguseid tüvirakkude funktsioone taastada, näiteks rakkude proliferatsioon ja kolooniate moodustumine, ning rekonstrueerida rakkude vananemisega seotud markerid.
Hiljuti uurisid Oberlohr ja tema kolleegid ulatuslikult rakkude vananemise rolli lihaste regenereerimise nõrgestamisel ning hindasid PRP ja trombotsüütide-vaese plasma (PPP) kui bioloogilisi ravivõimalusi skeletilihaste parandamiseks.Nad nägid ette, et PRP või PPP -ravi skeletilihaste parandamiseks põhineb SASP spetsiifiliste rakumarkerite jaoks kohandatud bioloogilistel teguritel ja muudel fibroosi arengut põhjustavate tegurite jaoks.
On mõistlik arvata, et enne PRP rakendamist võib rakkude sihipärane vananemine parandada bioloogilise ravi efektiivsuse regenereerimisomadusi, vähendades kohalikke SASP -tegureid.On tehtud ettepanek, et Veel üks võimalus parandada PRP ja PPP -töötluse tulemusi skeletilihaste regenereerimiseks on vananevate hävitajatega vananemisrakkude valikuliseks eemaldamine.Pole kahtlust, et hiljutised uurimistöö tulemused PRP mõju kohta rakkude ja vananemisele on põnev, kuid need on endiselt algfaasis.Seetõttu pole mõistlik teha praeguseid ettepanekuid.
(Selle artikli sisu trükitakse uuesti ja me ei anna selles artiklis sisalduva sisu täpsuse, usaldusväärsuse või täielikkuse eest otsest ega kaudset garantiid ega vastuta selle artikli arvamuste eest, palun mõistke.)
Postitusaeg: 01.03.2023